一、無菌操作的重要性

 

　　無菌操作是離體組織灌流系統(tǒng)實驗中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其目的在于防止細(xì)菌和其他微生物的污染，從而避免實驗結(jié)果的偏差。無菌操作不僅關(guān)系到實驗的成敗，還直接關(guān)系到實驗結(jié)果的可靠性和科學(xué)性。因此，在整個實驗過程中，必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范。

 

　　二、無菌操作的步驟

 

　　實驗前準(zhǔn)備：

 

　　確保實驗室環(huán)境清潔，通風(fēng)良好，定期進(jìn)行消毒。

 

　　操作者需穿戴整潔的實驗服，佩戴無菌手套和口罩，帽子，以減少皮膚、頭發(fā)等部位的微生物污染。

 

　　實驗器材需經(jīng)過嚴(yán)格的清洗、消毒和滅菌處理，如使用75%酒精擦拭、紫外線照射或高溫高壓蒸汽滅菌等。

 

　　操作過程：

 

　　在切開動物胸腔、暴露心臟等關(guān)鍵步驟時，需使用無菌手術(shù)器械，避免污染。

 

　　使用無菌注射器和針頭將灌流液緩慢注入主動脈，確保液體均勻流入心臟。此過程中，應(yīng)避免液體濺出或接觸到非無菌物品。

 

　　在連接灌流裝置、安裝血管環(huán)掛鉤等操作時，同樣需保持無菌狀態(tài)。

 

　　灌流液的配制與使用：

 

　　灌流液的配制需準(zhǔn)確，按照實驗要求精確稱量各組分，并在無菌條件下進(jìn)行配制。

 

　　灌流液在使用前應(yīng)進(jìn)行過濾除菌，以確保其無菌性。

 

　　灌流過程中，需保持液體的恒定流速，避免過高或過低的流速對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。

 

　　三、注意事項

 

　　溫度控制：

 

　　離體器官的活性受溫度影響顯著，因此需保持恒定的實驗溫度。通常，恒溫系統(tǒng)被用于維持實驗環(huán)境的溫度穩(wěn)定，如使用恒溫平滑肌槽等設(shè)備。

 

　　氣體供應(yīng)：

 

　　通氧是維持離體器官正常代謝的必要條件。在實驗過程中，需確保氧氣供應(yīng)穩(wěn)定，且以細(xì)小氣泡形式緩慢通入，以避免對器官造成機械性損傷。

 

　　離體器官的完整性與無菌性：

 

　　離體器官的完整性和無菌性是實驗成功的關(guān)鍵。在取出器官和連接器官時，需小心謹(jǐn)慎，避免損傷和污染。

 

　　實驗觀察與記錄：

 

　　在實驗過程中，需及時觀察離體器官的變化，并記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。這有助于分析實驗結(jié)果，并發(fā)現(xiàn)可能的問題。

 

　　實驗后處理：

 

　　實驗結(jié)束后，需對實驗器材進(jìn)行清洗和消毒，避免交叉污染。同時，樣本可根據(jù)實驗需求選擇適當(dāng)?shù)姆椒ū４?，如固定、冰凍或組織切片等。